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发布者: 发布时间:2017-10-16 16:43:43
慢病毒浓缩试剂盒
Lentivirus Concentration Solution
产品货号:JY03011 规格:50 mL 储存:4 ºC 销售价格:¥ 500
产品货号:JY03012 规格:100 mL 储存:4 ºC 销售价格:¥ 900
产品简介
慢病毒浓缩试剂盒中含有5×浓缩液,能对所有类型的慢病毒颗粒进行简单快速地浓缩。该试剂盒操作简单,仅需将5×浓缩液与慢病毒上清按比例混合并短时间孵育,然后使用普通的离心机离心,即可获得浓缩的慢病毒颗粒,回收率高达90%以上,可提高100倍病毒滴度。
为了加速科研进程,江苑生物还提供细胞基因过表达、shRNA/siRNA介导的基因沉默、CRISPR/Cas9介导的基因敲除等服务。
产品组分
保存条件
常温配送。4 ºC保存,1年有效。
注:瓶身标记MFG为生产日期,因生化与分子试剂贮存得当,可用时间长于有效期,故标出生产日期,方便提示试剂实际已贮存时间。
注意事项
1.本产品为无菌液,请注意无菌操作。
2.本产品仅用于科学研究。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
1.收集慢病毒上清液,0.45 μm滤膜过滤,以除去细胞和碎片。
注:如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜,不能用硝酸纤维素膜(NC)。若没有0.45 μm滤器,将上清3000 rpm,4 ℃离心5 min,弃沉淀亦可。若上清较多,可以1500 rpm离心5 min,将细胞及碎片离心到管底,再进行过滤,防止堵塞滤器。过滤时,将注射器与滤器卡紧,轻柔推动活塞,防止用力过度造成滤器崩离注射器,使得病毒液四溅。
2.将慢病毒上清与试剂盒中的浓缩液按照4:1的比例混合(上清液4份,浓缩液1份)4°C孵育过夜。刚开始时每隔30 min混匀一下,进行3次。
注:若时间不宽裕,可将孵育时间缩短为几小时。慢病毒颗粒在4 °C可以稳定保存数天。
3.于4°C,水平转子4000 g 离心25 min。
注:角转子会将病毒离心到管壁上,仔细分辨管壁上的白色沉淀并将其冲洗下来。
4.小心去除上清,不要晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见)。
5.用初始体积(原上清液体积)1/10 - 1/100的慢病毒溶解液、DMEM或PBS重悬病毒颗粒,小心吹打均匀,重悬沉淀物。
6.测定浓缩慢病毒样品的滴度,50 μL/管分装,于-80 °C冰箱保存。
注:病毒液一定要分装,切忌反复冻融,冻融一次病毒滴度将降低20-60%。
慢病毒滴度测定方法参考http://www.jiangyuanbio.com/news/xingyedongtai/179.html(江苑生物官网→新闻中心)